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北京英柏生物科技有限公司
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走科技興國(guó)之路,創(chuàng)自主國(guó)際品牌

新一代SPR分子垂釣技術(shù)
來(lái)源: | 作者:InterBio | 發(fā)布時(shí)間: 2025-04-26 | 126 次瀏覽 | 分享到:

表面等離子體共振(SPR)技術(shù)作為一種強(qiáng)大的生物物理工具,在分子垂釣領(lǐng)域展現(xiàn)出卓越的應(yīng)用價(jià)值。該技術(shù)憑借其高靈敏度、高特異性、實(shí)時(shí)活性監(jiān)測(cè)、自動(dòng)化進(jìn)樣和回收能力,結(jié)合高分辨質(zhì)譜的鑒定功能,不僅可以用于從細(xì)胞裂解液中篩選和捕獲蛋白質(zhì)等生物大分子,還能應(yīng)用于中藥和天然產(chǎn)物提取液中小分子化合物的篩選發(fā)現(xiàn)。從復(fù)雜粗樣本原液中特異性垂釣發(fā)掘出高價(jià)值分子和活性成分的獨(dú)特能力,使得分子垂釣技術(shù)成為現(xiàn)代生物醫(yī)藥和食品行業(yè)中備受關(guān)注的技術(shù),更多詳盡內(nèi)容請(qǐng)參閱北京英柏生物科技有限公司網(wǎng)站(http://www.michaeldavidking.net/)技術(shù)應(yīng)用下的《基于SPR的分子垂釣應(yīng)用綜述》。

 

2025410-11日,由儀器信息網(wǎng)主辦的第三屆分子互作技術(shù)及應(yīng)用進(jìn)展主題網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)成功召開(kāi)。此次會(huì)議特別開(kāi)設(shè)分子垂釣/抑制劑篩選新方法專題會(huì)場(chǎng),海軍軍醫(yī)大學(xué)曹巖副教授分享題為基于SPR的活性藥物高通量篩選方法研究精彩報(bào)告,報(bào)告中深入探討了基于新一代 SPR 分子垂釣技術(shù)的相關(guān)內(nèi)容,引發(fā)了與會(huì)者們的熱烈討論和思考。(曹老師報(bào)告視頻詳見(jiàn)英柏官網(wǎng))


關(guān)于SPR分子垂釣,曹巖副教授分別從回收效率、回收模式和維護(hù)成本三方面將英柏MI-S200系列 SPR分子垂釣技術(shù)與第一代分子垂釣技術(shù)進(jìn)行比較,對(duì)英柏MI-S200系列產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)結(jié)果給予高度肯定,并將其定義為新一代分子垂釣技術(shù)。

傳統(tǒng)SPR分子垂釣技術(shù)局限:

  • 回收效率低:基于傳統(tǒng)SPR儀器,其芯片單次回收體積僅為 2μL,獲取足夠量回收成分用于后續(xù)分析檢測(cè)需多次回收累積,耗時(shí)較長(zhǎng)。

  • 回收模式不靈活:SPR檢測(cè)中,分子對(duì)有不同的結(jié)合模式,傳統(tǒng)SPR的 固定回收模式只能回收部分成分,無(wú)法根據(jù)樣品的結(jié)合模式選擇回收特定部分如快下或慢下部分。

  • 維護(hù)使用成本高:傳統(tǒng)SPR無(wú)專門垂釣回收管路,用進(jìn)樣管路反轉(zhuǎn)回收樣品,導(dǎo)致儀器堵塞概率高,使用成本極大增高。

鑒于上述問(wèn)題,英柏生物針對(duì)性開(kāi)發(fā)了全新一代SPR儀器。該儀器在上述三個(gè)方面實(shí)現(xiàn)了質(zhì)的飛躍。

新一代SPR分子垂釣技術(shù)優(yōu)勢(shì):

  • 芯片設(shè)計(jì)優(yōu)化:英柏生物開(kāi)發(fā)的新一代SPR儀器有專門用于分子回收垂釣的芯片,流池面積增加至標(biāo)準(zhǔn)流池面積的5倍以上,單次回收樣品體積增多,單次可回收30μL,極大提高了回收效率。

  • 具備獨(dú)立回收管路:有獨(dú)立的回收流入和回收接口,避免重復(fù)使用管路,可自行控制回收液體積。

  • 雙模式回收:可設(shè)定兩種回收模式,能針對(duì)不同靶點(diǎn)和分析物進(jìn)行自定義設(shè)計(jì),選擇回收快下或慢下部分的成分。


為驗(yàn)證新一代SPR分子垂釣技術(shù)的可行性與有效性,曹巖副教授團(tuán)隊(duì)以固定TF受體為靶點(diǎn)開(kāi)展實(shí)驗(yàn),在配置了分子垂釣專用模塊的英柏MI-S200系列SPR上進(jìn)行實(shí)驗(yàn),與傳統(tǒng)經(jīng)典SPR儀器親和力檢測(cè)結(jié)果一致,證實(shí)新一代SPR儀器的可靠性(圖1)。隨后選取三種中藥,分別在兩種回收模式下對(duì)其與TF受體結(jié)合成分進(jìn)行回收,發(fā)現(xiàn)不同模式下回收成分既有獨(dú)特性又存在交叉(圖2)。進(jìn)一步對(duì)這些成分的親和力進(jìn)行初步篩選,并與傳統(tǒng)儀器檢測(cè)結(jié)果對(duì)比,確定強(qiáng)親和力成分,結(jié)果顯示兩種儀器親和力檢測(cè)結(jié)果高度一致(圖3)。對(duì)篩選出的化合物進(jìn)行效應(yīng)初步研究,證實(shí)其具有相應(yīng)活性。這一系列實(shí)驗(yàn)充分證明,基于英柏 MI-S200 系列SPR儀器親和力檢測(cè)數(shù)據(jù)結(jié)果穩(wěn)定可靠,其新一代分子垂釣技術(shù)相比傳統(tǒng)SPR的分子垂釣功能有著明顯優(yōu)勢(shì),其大流池、獨(dú)立管路、雙模式的設(shè)計(jì)特點(diǎn),為分子垂釣應(yīng)用提供了更為便利、靈活、高效的模式選擇,目前基于該技術(shù)開(kāi)展的多項(xiàng)工作已取得令人滿意的初步成果,這些研究成果也見(jiàn)證了英柏團(tuán)隊(duì)在該領(lǐng)域的持續(xù)進(jìn)步。


圖1 以TF受體為靶點(diǎn)的親和力測(cè)試結(jié)果對(duì)比

圖2 Inter-Bio MI-S200在兩種回收模式下,分別回收三種中藥與TF受體結(jié)合成分

回收模式:A自然解離 B洗脫解離


圖3 傳統(tǒng)SPR與Inter-Bio MI-S200測(cè)試化合物的親和力結(jié)果對(duì)比


【英柏SPR親和力檢測(cè)數(shù)值的準(zhǔn)確性,儀器運(yùn)行的可靠性的驗(yàn)證】


100%原研國(guó)產(chǎn)、100%零部件國(guó)產(chǎn)的英柏MI-S200系列產(chǎn)品是否可靠?分子互作親和力檢測(cè)是否與進(jìn)口儀器檢測(cè)結(jié)果一致?穩(wěn)定性、可靠性是否值得信賴?這些是廣大用戶最關(guān)心的問(wèn)題。


202310-20245月,受北京英柏生物科技有限公司委托,由中國(guó)儀器儀表學(xué)會(huì)科學(xué)儀器設(shè)備驗(yàn)證驗(yàn)評(píng)中心牽頭,聯(lián)合中國(guó)科學(xué)院生物物理研究所、清華大學(xué)蛋白質(zhì)研究技術(shù)中心、北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部、中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院前沿計(jì)量科學(xué)中心、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所、北京百普賽斯生物科技股份有限公司共同實(shí)施 表面等離子共振分子相互作用分析儀驗(yàn)證評(píng)價(jià),并形成報(bào)告。






該驗(yàn)評(píng)項(xiàng)目根據(jù)SPR儀器的特點(diǎn)由專家組制定了嚴(yán)格的評(píng)價(jià)內(nèi)容和實(shí)施方案,包括基本性能指標(biāo)測(cè)試,實(shí)際樣品測(cè)試和耐用性測(cè)試。在這三個(gè)方面的測(cè)試中英柏生物的MI-S200系列產(chǎn)品表現(xiàn)良好,尤其是在實(shí)際樣品(蛋白類Her2Herceptin;核酸類凝血酶和核酸適配體;多肽類GLP1R和司美格魯肽;小分子類碳酸酐酶II (CAII) Furosemide)的對(duì)標(biāo)測(cè)試中,不僅所有分子對(duì)親和力測(cè)試的結(jié)果全部與傳統(tǒng)SPR產(chǎn)品完全一致,而且部分測(cè)試圖形表現(xiàn)更好,特別是有挑戰(zhàn)的小分子測(cè)試,英柏生物的MI-S200系列與傳統(tǒng)SPR的靈敏度處于同一數(shù)量級(jí)水平,分子量檢測(cè)無(wú)下限。專家表示,這是非常震撼的表現(xiàn)。 




英柏生物歷時(shí)多年研制推出的分子相互作用分析系統(tǒng)MI-S200系列SPR,是國(guó)內(nèi)首家擁有100%完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)、全球獨(dú)有的分子垂釣?zāi)K,能夠與國(guó)際壟斷品牌比肩的首臺(tái)商業(yè)化SPR,打破進(jìn)口品牌產(chǎn)品壟斷,解決卡脖子問(wèn)題。




英柏生物獨(dú)家首創(chuàng)推出的在線蛋白活性檢測(cè)儀Lark-10,與液相色譜聯(lián)用,同時(shí)實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣本的色譜分離與親和檢測(cè)。


英柏生物獨(dú)家推出的全自動(dòng)蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)采用磁珠純化法,完成了從菌體破碎、樣品自動(dòng)轉(zhuǎn)移、樣品在線孵育到樣品親和層析分離的整合,實(shí)現(xiàn)大容量、高通量(8個(gè))蛋白質(zhì)分離純化全自動(dòng)操作。


英柏全新推出全球首款專為分子互作(SPR, BLI,MST) 研制的全自動(dòng)分子互作樣品制備系統(tǒng),支持自動(dòng)樣品梯度稀釋,溶劑校正樣品稀釋,轉(zhuǎn)板及分子互作常用濃度計(jì)算工具等,內(nèi)置過(guò)程追溯系統(tǒng)。




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